影响高效毛细管电泳色谱仪电泳淌度的因素净水配件

2022-09-09 09:29

影响高效毛细管电泳色谱仪电泳淌度的因素

高效毛细管电泳色谱仪电泳淌度又称电泳迁移率,是指带电颗粒在高效毛细管电泳仪毛细管中单位电场下的泳动速度。影响电泳迁移率的因素有内在因素和外界因素。一、影响电泳迁移率的内在因素:1、颗粒所带净电荷量:颗粒迁移率与颗粒所带净电荷量成正比。2、颗粒大小和形状:颗粒直径小而接近于球形,在电场中泳动速度快。3、DNA构象:一般迁移率为超螺旋环状DNA>线状DNA>单链开环DNA。二、影响电泳迁移率的外界因素:1、电场强度:一般来说,电场强度越高,带电颗粒移动速度越快。2、溶液pH:溶液pH决定被分离物的解离程度和质点的带电性质及所带净电荷量。溶液pH离pl越远,质点所带净电荷越多,电泳迁移率越大。因此,电泳时,应根据样品性质选择合适的pH值缓冲液。3、溶液离子强度:电泳液中的离子增加,会使电泳迁移率降低。原因是带电的离子会吸引相反符号的离子聚集在其周围,形成一个与运动离子符号相反的离子氛,使该离子向相反的方向运动,从而降低该离子的迁移率。4、温度:电泳过程中,由于通电会产生焦耳热,焦耳热对电泳有很大的影响。温度每升高1℃,迁移率增加约2.4%。为降低热效应对电泳的影响,可控制电压、电流和在电泳系统中安装冷却散热装置。5、支持物:支持物的吸附作用要小,否则电场强度不均匀,影响区带分离,使实验结果无法重复。6、电渗流:电渗流速度的微小变化会影响分离结果的重现性。

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